细胞培养技术基础教程

## 培养环境 - 温度：37°C - CO2 浓度：5% - 湿度：95% ## 基本操作流程 ### 1. 准备工作 - 超净台紫外灭菌 30 分钟 - 试剂预热至 37°C - 穿戴实验服和手套 ### 2. 细胞传代 1. 吸除旧培养基 2. PBS 洗涤 1-2 次 3. 加入胰酶消化 2-3 分钟 4. 加入完全培养基终止消化 5. 吹打分散细胞 6. 按 1:2 或 1:3 比例传代 ### 3. 细胞冻存 - 冻存液：90% FBS + 10% DMSO - 程序降温：-1°C/分钟 - 液氮保存 ## 污染防控 - 定期检测支原体 - 抗生素使用适度 - 严格无菌操作